Introduction: The non-invasive prenatal
diagnosis of the fetus RhD genotype in RhD incompatibility has a crucial role
in the prevention of increased anti-D immunoglobulin therapy for haemolytic
diseases in pregnant women carrying RhD negative fetus. It was aimed to detect
fetal RhD genotyping by using maternal circulating cell-free DNA in the current
study.
Methods: Maternal blood samples were
collected in different trimester of pregnancies (12-40 weeks) in 12 D-negative
mothers. Cell-free fetal DNA was extracted from 2 ml of maternal plasma by an
conventional DNA isolation technique (Qiagen, Hilden, Germany) and real-time
PCR was performed for genotyping target RhD exons 7 and 10 and GLO genes.
Postnatal serological evaluations were performed and the results were
confirmed.
Results: 6 cases (50 %)
were determined D positive and 6 cases (50 %) were determined D negative. All
results were also confirmed after birth serologically.
Conclusions: In conclusion,
the current results showed us the non-invasive target RhD genotyping from cell
free fetal DNA from maternal plasma samples have a diagnostic accuracy in RhD
incompatibility pregnancies.
maternal plasma Cell free fetal DNA prenatal screening real-time PCR
Giriş: Rh uyuşmazlığında fetusun
RhD genotipinin girişimsel olmayan prenatal tanısı, RhD negatif fetus taşıyan
gebelerin hemolitik hastalıklar için artmış anti-D immünoglobulin tedavisinin
önlenmesinde önemli bir role sahiptir. Bu çalışmada maternal plazmadaki hücre
dışı DNA kullanılarak fetal RhD genotiplemesinin saptanmasının tanısal
doğruluğunu tespit etmek amaçlandı.
Yöntem: Rh uyuşmazlığı bulunan
farklı gebelik haftalarında (12-40 hafta), D negatif 12 gebeden periferik kan
örnekleri toplandı. 2 ml maternal plazma kullanılarak konvansiyonel bir DNA
izolasyon tekniği (Qiagen, Hilden, Almanya) ile hücre dışı DNA izole edildi.
Real Time PCR tekniği kullanılarak fetal RhD geni ekzon 7, ekzon 10 ve GLO
geninin genotiplemesi yapıldı. Postnatal serolojik değerlendirmeler yapılmış ve
sonuçlar doğrulanmıştır.
Bulgular: 6 olgu (% 50) D pozitif, 6 olgu (% 50) D
negatif olarak belirlendi. Tüm sonuçlar ayrıca serolojik olarak doğumdan sonra
doğrulandı.
Sonuç: Sonuç olarak RhD uyuşmazlığı görülen gebelerde girişimsel olmayan bir
yöntem olarak maternal plazmadan elde edilen hücre dışı fetal DNA kullanılarak
yapılan RhD genotiplemesinin tanısal doğruluğa sahip olduğu gösterildi.
Hücre dışı fetal DNA maternal plazma prenatal tarama real time PCR
Birincil Dil | İngilizce |
---|---|
Konular | Sağlık Kurumları Yönetimi |
Bölüm | Araştırma Makalesi (Original Article) |
Yazarlar | |
Yayımlanma Tarihi | 18 Mart 2019 |
Gönderilme Tarihi | 26 Nisan 2018 |
Kabul Tarihi | 12 Aralık 2018 |
Yayımlandığı Sayı | Yıl 2019Cilt: 4 Sayı: 1 |